蜜桃av色偷偷av老熟女,人妻丰满精品一区二区a片,亚洲精品第一国产综合野草社区,日韩亚洲av人人夜夜澡人人爽

熱門搜索: 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標(biāo)簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標(biāo)簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細(xì)胞 2%雞紅細(xì)胞 1%雞紅細(xì)胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長(zhǎng)因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白 重組人ER膜蛋白復(fù)合物亞基8蛋白(COX4NB)

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術(shù)文章  /  感受態(tài)細(xì)胞的電轉(zhuǎn)化過程

感受態(tài)細(xì)胞的電轉(zhuǎn)化過程

更新時(shí)間:2013-05-26      瀏覽次數(shù):2094

        zui近,上海信帆生物科技有限公司在進(jìn)行了一項(xiàng)大腸桿菌電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程操作規(guī)范順利,得出的結(jié)果良好。

實(shí)驗(yàn)所需試劑:國(guó)產(chǎn)細(xì)胞菌株、培養(yǎng)基、10%甘油、DNA細(xì)胞

*天:
1. 將適合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上,在37°C下過夜培養(yǎng)
2. 高溫滅菌大的離心瓶(250-500ml)以備第二天搖瓶用
3. 準(zhǔn)備幾瓶滅菌水(總量約1.5升),保存于冷凍室中以備第二天重懸浮細(xì)胞用

第二天:
4. 轉(zhuǎn)移0.2-1ml過夜培養(yǎng)物至裝有500ml LB(或其他營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基)的1-2升擋板搖瓶中
5. 37°C下劇烈振蕩培養(yǎng)2-6小時(shí)
6. 定時(shí)監(jiān)控O.D.600值(培養(yǎng)1小時(shí)后每半小時(shí)測(cè)定一次)
7. 當(dāng)O.D.600值達(dá)到0.5-1.0時(shí),從搖床中取出搖瓶,置于冰上冷卻至少15分鐘(需要的話這種方式可以存放培養(yǎng)液數(shù)小時(shí))
8. 細(xì)胞在4°C 5000g下離心15分鐘,棄上清液(如需要,沉淀可在4°C的10%甘油中保存一兩天)
9. 用滅菌的冰水重懸浮細(xì)胞。先用渦旋儀或吸液管重懸浮細(xì)胞于少量體積中(幾毫升),然后加水稀釋至離心管的2/3體積。
10. 照上面步驟重復(fù)離心,小心棄去上清液
11. 照上面步驟用滅菌的冰水重懸浮細(xì)胞
12. 離心,棄上清液
13. 用20ml滅菌的、冰冷后的10%甘油重懸浮細(xì)胞 14. 照上面步驟離心,小心棄去上清液(沉淀可能會(huì)很松散)
15. 用10%甘油重懸浮細(xì)胞至zui終體積為2-3ml
16. 將細(xì)胞按150μl等份裝入微量離心管,于-80°C保存

轉(zhuǎn)化方法:
1. 在冰上解凍電感受態(tài)細(xì)胞添加1-10μl DNA ,冰上培育約5分鐘
2. 添加1-3μl DNA ,冰上培育約5分鐘
3. 轉(zhuǎn)移DNA/細(xì)胞混合物至冷卻后的2mm電穿孔容器(無泡)中
4. 加載P1000,準(zhǔn)備好300μl LB 或 2xYT
5. 對(duì)電穿孔容器進(jìn)行脈沖(200 歐姆, 25μFd, 2.5 千伏)(檢查時(shí)間常數(shù),應(yīng)該在3以上)
6. 立即添加300μl 的LB或2xYT至電穿孔容器中
7. 37°C下培養(yǎng)細(xì)胞40分鐘至1小時(shí)以復(fù)原
8. 轉(zhuǎn)移細(xì)胞至適當(dāng)?shù)倪x擇培養(yǎng)基上培養(yǎng) 

 

微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號(hào)B幢7樓

Copyright © 2024 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號(hào):滬ICP備13019554號(hào)-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信
日韩无矿砖一线二线| 亚洲精品乱码久久久久久不卡| 韩国理论片漂亮的小峓子| 国产福利一区二区三区在线观看| 极品少妇高潮啪啪av无码吴梦梦| 山沟夜晚炕上的呻吟肉版小说| 美妙人妻系列100部| 亚洲 欧美 偷自乱 图片| 大陆农村妇女老bbwbbw| 美女视频大全免费的软件| 狠狠色丁香婷婷综合久久 | 性无码专区无码| 欧美性受xxxx| 国精产品一二三区传媒公司| 免费看国产成年无码AV片| 18禁免费羞羞视频无码网站| 精品无码久久久久久国产| 办公室玩弄娇喘秘书在线观看 | 啊灬啊灬啊灬快灬深视频直播| 黑人荫道bbwbbb大荫道| 按摩师舌头进去添的我好舒服 | 晚上睡不着看点害羞的东西| 少妇极品熟妇人妻高清性色av| 被十几个男人扒开腿猛戳| free性熟女妓女tube| 888影视网| 最近日本mv字幕免费观看| 365天今时之欲| 国产片xxxxa片国语对白| 2019国自产拍| 久久久久久精品免费看a片| 国产激情无码一区二区三区| 欧美性猛交xxxx| 我和虎狼之年的岳135章 | 装睡被陌生人摸出水好爽| 日b视频| 丰满老熟好大BBB| 在线日本v二区不卡| 呦系列视频一区二区三区| 一本一道av无码中文字幕麻豆| 久久免费看少妇高潮A片18禁|