PRODUCT CLASSIFICATION
產(chǎn)品分類上海信帆生物供應血管緊張素1放免試劑盒,提供放免檢測服務!該試劑盒樣本收集的時候,請一定加入酶抑制劑,如果要檢測的話,樣本收集好了,請盡快檢測!本公司是提供放免實驗代測服務的,如果您有不清楚的地方,可以隨時咨詢我們!
血管緊張素Ⅰ放免分析試劑盒
125I- Angiotensin Ⅰ Radioimmunoassay Kit
AⅠ RIA Kit
原理(Principles)
血漿腎素活性(PRA)的測定是以血管緊張素Ⅰ (AⅠ)產(chǎn)生的速率來表示的。血漿中加入
酶抑制劑來抑制轉(zhuǎn)化酶和血管緊張素酶的活性,AⅠ不再進一步降解,使測定結果準確。PRA
的測定是取雙份血漿,一份血漿在 37℃溫育一小時,使腎素作用于血管緊張素原產(chǎn)生 AⅠ作為
測定管,另一份血漿在 4℃放置作為對照管。應用放射免疫分析法 AⅠ的濃度減去對照管 AⅠ
的濃度,被溫育時間除之,則為單位時間內(nèi) AⅠ產(chǎn)生的速率,稱為腎素活性。本分析藥盒標記
物為 125I-AⅠ,采用免疫分離劑分離,快速﹑方便﹑準確。
用途(Intended Use)
腎素是由腎臟近球體細胞產(chǎn)生的分子量為 40000 的一種羧基蛋白水解酶。它作用于血管緊
張素原產(chǎn)生血管素Ⅰ(AⅠ10 肽)。AⅠ在轉(zhuǎn)化酶的作用下形成血管緊張素(AⅡ 8 肽)。腎素-血
管緊張素系統(tǒng)有多種生理功能。在調(diào)節(jié)人體血壓、水和電解質(zhì)平衡代謝過程中起著重要作用。
另外,它與一些腎臟疾病及與腎臟有關的一些疾病有密切關系。
血漿腎素活性(PRA)和 AⅡ濃度的測定已成為原發(fā)性和繼發(fā)性高血壓分型診斷、治療及
研究的重要指標。對一些有關腎臟疾病的診斷、治療以及發(fā)病機理的探討有著重要的意義。
藥盒組成(Components of Kit)
1)
AⅠ標準品:凍干品,一套共 7 瓶,用 1 mL 溫育液溶解
A
B
C
D
E
F
單位
0
0.2
0.6
1.8
5.4
12
ng/mL
2)
125I-AⅠ: 1 瓶 凍干品,100T 用 11 mL 溫育液溶解,50T 用 5.5 mL 溫育液溶解。
標準品、標記物溶解后分裝–10℃保存可用一個月,避免反復凍融。
3)
AⅠ抗體:
1 瓶 凍干品,100T 用 12 mL 溫育液溶解,50T 用 6 mL 溫育液溶解,
4) 溫育液:
1 瓶
5) 分離劑:
1 瓶 使用前必須充分搖勻
6) 抗凝劑:
1 瓶 若有晶體析出可加熱溶解
7) 酶抑制劑: 2 瓶
正常參考值(Normal Serum values)
各實驗室應根據(jù)本實驗室條件及接觸人群的不同,建立自己的正常值范圍。
下列數(shù)據(jù)僅供參考:
坐姿: 1.68 ± 1.12 ng/mL注意事項(Attention):血樣的采集和保存
1) 待樣本脈搏穩(wěn)定后,坐姿采集肘靜脈血 2 mL,迅速注入在冰水浴中冷卻的含 20 μL EDTA 的
試管中,搖勻,放冰水浴中冷卻后,在 1000 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘( 4℃離心),分離血漿,
取血漿 1 mL 放入另一支已預冷的含有 10 μL 酶抑制劑 1 和 20 μL 酶抑制劑 2 的試管中搖勻,
立即測定或置–20℃冰箱保存,可用兩周。
2) 激發(fā)試驗,樣本在基礎狀態(tài)采血后,給肌肉注射速尿(0.7 mg/Kg 體重)??倓┝坎怀^ 50
mg,保持立位不飲水,兩小時后坐姿采血。
注意:注射速尿后兩小時內(nèi)隨尿排出的水電解質(zhì)較多,如樣本血鉀過低,試血前應適當給
予補充,試驗過程中樣本可能出現(xiàn)口渴、無力、出汗等,一般不重,如過重應酌情終止試
驗,讓樣本平臥,并給予糖鹽茶水。
3) β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內(nèi)腎素水平,一般在停藥兩周
后測 PRA,得血平等代謝慢的藥物應停藥三周后測定,不適停藥的樣本應改服胍乙啶等影
響 PRA 較小的降壓藥。
4) 鈉攝入量影響機體 PRA 水平,樣本測定 PRA 三天前應適當減少鈉鹽攝入量,樣本應測定
取血前 24 小時尿鈉的含量,以供分析 PRA 結果時參考。
操作流程(Assay Procedure)
冰凍的血漿樣品在流動的冷水中快速融化,快速取兩份樣品,一份作對照管的放冰水浴中,一
份做測定管的在 37℃水浴中保溫 1 小時,取出后放入冰水浴中。隨后在冰水浴中按下表加樣
單位:μL
T
NSB
標準品
樣品
A
B
C
D
E
F
G
1
2
···
溫育液
200
標準品
100
100
100
100
100
100
100
樣
品
對照管
100
100
···
測定管
100
100
···
125I-AⅠ
100
AⅠ抗體
100
搖勻,4℃放 15 小時以上
分離劑
500
充分混勻,室溫放置 15 分鐘后,3500 rpm 離心 20 分鐘
吸去上清液
沉淀計數(shù) 1 分鐘
數(shù)據(jù)處理(Calculation)
按常規(guī)方法計算 NSB%、B0%、B/B0%
在半對數(shù)坐標紙上,以標準品 AⅠ濃度為橫坐標,以 B/B0%為縱坐標,繪制標準曲線,根
據(jù)血漿樣品(B/B0%)從標準曲線上查得樣品測定管和對照管相應的 AⅠ濃度值。
PRA ng/mL/hr = 測定管 AⅠ濃度 – 對照管 AⅠ濃度
(當血漿 AⅠ濃度超過標準曲線范圍時,應將 37℃處理的血漿用溫育液適當稀釋后復測)
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