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技術(shù)文章/ Technical Articles

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  • 2015

    8-13

    聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReactionPCR)是一種體外擴(kuò)增特異性DNA片段的技術(shù)。它可以在體外特異地對(duì)目的基因進(jìn)行大量擴(kuò)增,其巧妙之處在預(yù)先設(shè)計(jì)合成二段分別與待測(cè)目的基因二端互補(bǔ)的引物,以起到指向定點(diǎn)的作用;再借助于DNA聚合酶催化的若干次擴(kuò)增反應(yīng)后,即可使特定的基因片段成百萬(wàn)倍的擴(kuò)增。擴(kuò)增反應(yīng)分三步:①變性:當(dāng)通過(guò)加熱使DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,雙鏈解離形成單鏈DNA。②褪火:當(dāng)溫度突然降低時(shí)由于模板分子結(jié)構(gòu)較引物要復(fù)雜得多,而且反應(yīng)體系中引物DNA...

  • 2015

    8-12

    上海信帆生物代做PCR實(shí)驗(yàn),包括實(shí)時(shí)熒光定量PCR,電泳PCR等,歡迎。什么是PCR實(shí)驗(yàn)的靈敏度?靈敏度指的是PCR擴(kuò)增反應(yīng)能夠檢測(cè)到目的基因的zui小值。研究結(jié)果表明,影響PCR擴(kuò)增效率的因素,如模板的復(fù)雜程度與完整性、引物的純度及其與模板的結(jié)合效率、反應(yīng)溫度、DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性與擴(kuò)增性能、反應(yīng)緩沖液的離子組成(主要指陽(yáng)離子)、反應(yīng)優(yōu)化劑等等,都決定了PCR實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)靈敏度。在*的擴(kuò)增條件下,常規(guī)PCR反應(yīng)能夠檢測(cè)到的pg(10-12g)數(shù)量級(jí)的目的基因。對(duì)于一個(gè)特定的...

  • 2015

    8-10

    上海信帆生物代理銷(xiāo)售“丙酮酸脫氫酶(PDH)試劑盒”,現(xiàn)貨供應(yīng),提供技術(shù)指導(dǎo)和售后服務(wù),歡迎。測(cè)定步驟調(diào)零用蒸餾水于605nm處調(diào)零。樣本測(cè)定(1)取900μL工作液加入1mL玻璃比色皿,在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)中孵育5min。(2)取出比色皿,加入50μL酶液,混勻;立即記錄605nm處初始吸光值A(chǔ)1,37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)中準(zhǔn)確反應(yīng)1min,記錄605nm處1min后的吸光值A(chǔ)2,計(jì)算ΔA=A1-A2。丙酮酸脫氫酶(PDH)試劑盒注意事項(xiàng)1...

  • 2015

    8-4

    上海信帆生物告訴大家:ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程中各種樣本不同的處理方法在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。液體類(lèi)標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次...

  • 2015

    7-27

    上海信帆生物代理銷(xiāo)售“乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒”,現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎大家。乳酸脫氫酶(LactateDehydrogenase,LDH)試劑盒測(cè)定意義:LDH(EC1.1.1.27)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。測(cè)定原理:LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步與2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。需自備的儀器和...

  • 2015

    7-23

    通用RT-PCR試劑盒(AMV)本試劑盒適用于各種RNA制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以及隨后的PCR擴(kuò)增。它采用AMV進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),能夠獲得更長(zhǎng)的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。同時(shí),在20ul反轉(zhuǎn)錄體系和50ulPCR反應(yīng)體系中,還可以一次性得到足夠量的PCR產(chǎn)物用于后續(xù)的克隆實(shí)驗(yàn)。本試劑盒中配置的酶均為進(jìn)口的酶。RT酶采用進(jìn)口的AMV,所以cDNA更長(zhǎng),基因的信息保留得更完整!反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗的風(fēng)險(xiǎn)。本試劑盒使用方便、快捷,可廣泛用于cD...

  • 2015

    7-21

    上海信帆生物代理銷(xiāo)售‘人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)?試劑盒’,試劑盒采用進(jìn)口材料生物試劑,專(zhuān)業(yè)的酶免專(zhuān)家,提供免費(fèi)代測(cè),數(shù)據(jù)分析,技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)全國(guó)各地。人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)?試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品...

  • 2015

    7-17

    基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/9明膠酶譜法試劑盒采用酶譜法(zymography)檢測(cè)MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法,其靈敏度可達(dá)1nM,高于ELISA。其基本原理和程序是:制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠,含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳,電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer孵育,凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中...

  • 2015

    7-10

    關(guān)于Elisa試劑盒的發(fā)展方向研究測(cè)定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展,而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生物試劑技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。目前,分子生物學(xué)正在并zui終肯定會(huì)讓我們對(duì)整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認(rèn)識(shí),其對(duì)免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的,它使我們對(duì)以前一些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定變得輕而易舉,并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而...

  • 2015

    7-3

    ELISA實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中:溫育的溫度和方式有哪些以及注意事項(xiàng),上海信帆生物給你全面的解答。溫育的溫度:育常采用的溫度有43、37℃、室溫或4℃等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的溫育溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的zui適反應(yīng)溫度??乖贵w反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2h產(chǎn)物的生成可達(dá),為加速反應(yīng),可在一定范圍內(nèi)提高反應(yīng)的溫度并在反應(yīng)過(guò)程中連續(xù)振蕩來(lái)增加抗原抗體接觸的概率。抗原抗體反應(yīng)在4℃更為*,形成的產(chǎn)物更多、更穩(wěn)定,但因所需時(shí)間太長(zhǎng),在ELISA檢測(cè)中一般不予采用。溫育的方式:溫育方式常...

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